Pytanie:
Chromatografia gazowa / spektrometria mas: czy mogę wykorzystać współczynniki pików i masę cząsteczkową do obliczenia ilości?
Anthony
2012-05-07 14:20:39 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Potrafię określić ilość substancji z raportu GC / MS, jeśli wiem:

  • stosunek do innej substancji w danych,

  • ilość tej drugiej substancji oraz

  • masa cząsteczkowa obu substancji.

Witryna była bardzo obszerna i niejasna, jeśli chodzi o sposób działania testów GC / MS, ale dość otwarta na temat tego, jak wyliczają swoje wskaźniki.

Oto liczby (nieznacznie poprawione, ale mniej więcej proporcjonalnie):

Substancja A:

  • Ilość: 300 USD \: \ pu {mg} $ (Już wiem, nie jest częścią raportu GC / MS)
  • Mol. Masa: 500 USD \: \ pu {g / mol} $ (znalezione w źródle zewnętrznym)
  • Proporcja szczytowa: 3

Substancja X:

  • Ilość: nieznana
  • Mol. Masa: 425 USD \: \ pu {g / mol} $ (znowu, źródło zewnętrzne)
  • Proporcja szczytowa: 1

Dla jasności stosunek 1: 3 oznacza, że ​​substancja X ma poziomy szczyt $ \ frac13 $ substancji A. Nie jestem pewien, czego właściwie mierzy oś X, co jest jednym z powodów, dla których jestem zagubiony. Witryna wyraźnie mówi, że proporcje nie są wprost proporcjonalne do stosunku masy (więc jeśli znaleziono stosunek 3: 1 glukozy do arsenu, nie oznacza to, że substancja składa się z 75% glukozy i 25% arsenu, tylko że „szczyty” glukozy są trzykrotnie wyższe, co rozumiem jako „3 razy większa niż masa”, ale to też może być błędne).

Więc jeśli wiem, że masa cząsteczkowa ($ \ rm M $) substancji X to 0,85 substancji Y, czy mogę obliczyć faktyczną masę substancji X ze wzoru:

\ begin {equation} \ mathrm {qty} _X = \ frac {\ mathrm {qty} _A \ times (M_X / M_A)} {\ mathrm {szczyt} _A / \ mathrm {szczyt} _X} \ end {equation}

z danymi:

\ begin {equation} \ rm qty_X = \ frac {300 \: \ pu {mg} \ times (425/500)} {3/1} \ end {equation}

Co upraszcza to:

\ begin {equation} \ rm qty_X = (300 \: \ pu {mg} \ times 0.85) / 3 \ end {equation}

i na koniec wynik 85 $ \: \ mathrm {mg} $.

Myślę, że na końcu są 3 pytania:

  1. Czy w ogóle tak działają wyniki GC / MS?
  2. Jeśli tak, czy moje założenie, aby wyprowadzić tajemniczą wielkość na podstawie masy cząsteczkowej, jest poprawne?
  3. Czy matematyka sama w sobie jest w porządku ? (Szczególnie martwię się, że powinienem odwrócić albo stosunek masy, albo stosunek szczytów, albo oba).

Oczywiście, jeśli odpowiedź na pierwsze pytanie brzmi: nie, to moje prawdziwe pytanie to: czy mogę wyliczyć ilość substancji X na podstawie podanych danych, a jeśli tak, jakie byłoby właściwe podejście?

Jeśli ktoś jest ciekawy jakiegoś kontekstu, muszę znać rzeczywistą ilość substancji X, ponieważ wiem, że pod względem masy ma próg między nieszkodliwą a toksyczną, więc sama wiedza, że ​​substancja X to $ \ frac13 $ „szczyt” substancji A, nie pozwala mi wiedzieć, czy powinienem pozwolić swojemu psu / dziecku / sobie połknij to.

Sposób, w jaki to przedstawiłeś, nie brzmi tak, jakbyś naprawdę używał GC / MS, ale tylko chromatografii gazowej. Wysokość tych pików zależy od odpowiedzi detektora i wydaje się głupie, jeśli używasz detektora MS w sposób, który tu sugerujesz.
Dwa odpowiedzi:
#1
+7
SpectacularKat
2012-05-10 08:15:51 UTC
view on stackexchange narkive permalink
  Czy w ten sposób działają wyniki GC / MS?  

Jak powiedział cbeleites, metoda, którą opisałeś, jest właściwą techniką, ale prawdopodobnie nie będzie odpowiednie, biorąc pod uwagę cytowane informacje.

W GC / MS powinieneś mieć dwa zestawy informacji. Pierwszym jest chromatograf całkowitego jonu GC (TIC), który będzie miał czas jako oś x i odpowiedź (obfitość) jako oś y. Dla każdego czasu retencji na TIC będą odpowiadały widma masowe (MS). W MS oś x to m / z (jon), a oś y to również odpowiedź (obfitość).

Różne związki mają różne odpowiedzi, więc jeśli wstrzykniesz dokładnie taką samą ilość dwóch różnych związków, może uzyskać znacznie większą odpowiedź od jednego w porównaniu do drugiego. Na przykład tramadol daje znacznie wyższą odpowiedź w porównaniu z hydrokodonem. Dlatego chcesz, aby Twój wzorzec wewnętrzny był strukturalnie podobny do analitu.

Kwantyfikację związku często przeprowadza się przez uruchomienie 3 - 5 kalibratorów przy znanych stężeniach w celu sporządzenia krzywej kalibracji. Po uzyskaniu dopuszczalnej krzywej kalibracji próbkę wraz z kontrolami można dopasować do krzywej w celu obliczenia ilości związku będącego przedmiotem zainteresowania w próbce i kontrolach. Jeśli kontrole są prawidłowe, można użyć wartości próbki.

Aby sporządzić krzywą kalibracji, potrzebny jest wzorzec wewnętrzny w każdym kalibratorze, kontroli i próbce. Następnie możesz wykonać krzywą albo ze stosunkami jonów między sparowanymi wewnętrznymi wzorcami a jonami analitu LUB jeśli twoja wewnętrzna odpowiedź wzorcowa jest spójna we wszystkich kalibratorach, kontrolach i próbkach, możesz użyć szczytowej odpowiedzi GC.

Podsumowując jeśli masz tylko jeden przebieg GC / MS z dwoma różnymi związkami, nie będziesz w stanie łatwo obliczyć ilości drugiego związku na podstawie odpowiedzi GC pierwszego, chyba że masz dodatkowe informacje, które nie zostały wymienione w tym pytaniu .

Masz rację. Odnośnik do niemieckiej chemgapedii pokazuje kalibrację. W jakiś sposób założyłem, że PO próbował zrozumieć wewnętrzną standardową część procedury analitycznej * ktoś inny przeprowadza * - czytając ponownie pytanie, być może źle zrozumiałem, o co tak naprawdę chodzi.
I na pewno jest wątpliwe, czy kalibracja z samym nachyleniem i punktem przecięcia wymuszonym do zera (tak czytam ten tajemniczy czynnik) jest właściwa.
#2
+4
cbeleites unhappy with SX
2012-05-09 04:48:03 UTC
view on stackexchange narkive permalink

To brzmi tak, jakby A był wewnętrznym standardem do określania B.

Standardy wewnętrzne służą do pozbycia się (małych) zmienności multiplikatywnej spowodowanych przez pewne wpływy, np.

  • w GC, wstrzyknięta objętość
  • w spektroskopii optycznej, długość ścieżki optycznej lub oświetlona objętość.

Czasami obliczenia część pomysłu nazywa się normalizacja.

Angielska strona Wiki dotycząca współczynnika odpowiedzi wyjaśnia wewnętrzny standard (i obliczenia).

Ważną częścią jest:

Jednym z głównych powodów stosowania współczynników odpowiedzi jest skompensowanie niemożności odtworzenia ręcznych wstrzyknięć do chromatografu gazowego (GC). Objętości wstrzyknięcia dla GC mogą wynosić 1 mikrolitr (µL) lub mniej i są trudne do odtworzenia. Różnice w objętości wstrzykniętego analitu prowadzą do różnic w obszarach pików na chromatogramie i wszelkie wyniki ilościowe są podejrzane.

Więc przełączasz całą kalibrację na odpowiedź znormalizowaną do odpowiedzi wzorzec wewnętrzny (= analit sygnał / wzorzec wewnętrzny sygnału), a wynikiem jest stężenie analitu / stężenie wzorca wewnętrznego = ilość molowa analitu / ilość molowa wzorca wewnętrznego. Znając ilość / stężenie wzorca wewnętrznego możesz obliczyć z powrotem ilość / stężenie analitu.

Jeśli znasz język niemiecki, oto inne wyjaśnienie i przykładowe obliczenia HPLC.

Analiza instrumentalna Skooga &a Leary'ego mówi, że przy odpowiednim wewnętrznym standardzie dokładność < 1% jest możliwa.

Jeśli więc Twoje A jest standardem wewnętrznym, to tak, to jest Należy jednak pamiętać, że arsen nie brzmi jak wewnętrzny wzorzec dla glukozy (ani odwrotnie): wzorzec wewnętrzny powinien być

  • jak najbardziej podobny do analitu

  • ale sygnał nie powinien nakładać się na inne substancje

  • dla GC / MS, który może być nawet wersją analitu znakowaną izotopem dla maksymalnego podobieństwa chemicznego.



To pytanie i odpowiedź zostało automatycznie przetłumaczone z języka angielskiego.Oryginalna treść jest dostępna na stackexchange, za co dziękujemy za licencję cc by-sa 3.0, w ramach której jest rozpowszechniana.
Loading...